Aislamiento y Caracterización de Células Troncales Mesenquimales en Sangre Periférica Humana

Resumen

Antecedentes: Las células troncales mesenquimales (CTM) se caracterizan por la expresión de marcadores de superficie específicos (CD73, CD90 y CD105) y por su capacidad de diferenciarse a los tres linajes de la línea mesenquimal (cartílago, hueso y tejido adiposo). Actualmente, la médula ósea (MO) es considerada la principal fuente de CTM en individuos adultos para su utilización en Ingeniería Tisular. La sangre periférica movilizada ha sido utilizada como fuente eficaz de CTM. Sin embargo, el aislamiento de CTM de remanentes de sangre periférica de donación no ha sido estudiado. Objetivo: Aislar y caracterizar CTM de sangre periférica del remanente de bolsas de donación (Buffy-coat). Metodos: Se obtuvieron 6 muestras de 20 ml de Sangre Periférica Humana (SPH) remanente de paquetes globulares en el INR-LGII. Las células mononucleares se aislaron con Ficoll, se cultivaron y expandieron durante 14 días. Resultados: Durante el aislamiento se identificó la presencia de un 8% de células positivas a marcadores de CTM (CD73, CD90 y CD105). Durante el cultivo se identificaron 2 poblaciones celulares: CT-hematopoyéticas y CT-Mesenquimales. A los 14 días de cultivo hubo una disminución de las células positivas a marcadores hematopoyéticos y un incremeto significativo de la positividad a marcadores de CTM. Conclusiones: Es posible aislar del remanente de donación sanguínea células con marcadores positivos para CTM
(CD73, CD90 y CD105), capaces de adherirse al plástico y multiplicarse disminuyendo significativamente su expresión de marcadores hematopoyéticos e incrementando la de marcadores característicos del linaje mesenquimal a los 14 días de cultivo in-vitro.