Evaluación de una membrana radioesterilizada de policaprolactona-gelatina-alginato como andamio para fibroblastos dermales

Resumen

Introducción. El desarrollo de sustitutos temporales de piel se ha convertido en un tema de gran interés debido a su potencial para mejorar la cicatrización de heridas por quemaduras; así como, para reducir la inflamación, promover la proliferación celular y la regeneración tisular. En consecuencia, se han desarrollado diversos métodos de síntesis, siendo el electrohilado una técnica novedosa para desarrollar andamios interconectados, nanofibrosos y porosos. Se ha reportado que la combinación de dos o más polímeros puede mejorar la biocompatibilidad celular y las propiedades mecánicas para imitar la matriz extracelular nativa de la piel. Objetivo. Nosotros proponemos evaluar una membrana radioesterilizada de polycaprolactona-gelatina-alginato como andamio para fibroblastos dermales. Metodología. Las soluciones para electrohilado se prepararon individualmente, PCL 60% p/v disuelto en Ac. Acético, GEL 25% p/v en Ac. Fórmico y ALG 15% p/v en DSMO y Ácido fórmico.  La membrana fibrilar fue obtenida por electrohilado a 20kV y 0.5 mL/h. Una vez obtenidas las membranas se radioesterilizarón. La morfología de las fibras electrohiladas se observó por Microscopía Electrónica de Barrido (SEM). la estructura química de las membranas se estableció por Espectroscopia Infrarroja por Transformada de Fourier (FTIR). Para determinar la respuesta biológica se sembraron fibroblastos dermales en las tres membranas electrohiladas (PCL; PCL-GEL y PCL-GEL-ALG) respectivamente, se analizaron mediante la prueba de Calceína Am (Invitrogen®). Para determinar la proliferación celular se realizó un ensayo de inmunofluorescencia para Ki67. Resultados. Estandarizamos la síntesis de una membrana electrohilada de PCL-GEL-ALG, la cual se radioesterilizó observando que este proceso no modificó las características de la membrana, observamos que las membranas presentan un color blanco, son flexibles, resistentes a la manipulación y suaves al tacto, con espesor de aproximadamente 0.8 mm (PCL), 0.86 mm (PCL-GEL) y 0.89 mm (PCL-GEL-ALG) respectivamente. Con las micrografías de SEM, observamos una morfología fibrilar homogénea con orientación aleatoria, además de presentar porosidad interconectada. También determinamos que no hay cambios químicos en la estructura general de las membranas. Con el ensayo de viabilidad celular determinamos que los fibroblastos dermales, sembrados en las membranas se mantuvieron viables hasta por siete días. Mientras que con el ensayo de inmufluorescencia observamos que los fibroblastos dermales sembrados en la membrana de PCL-GEL-ALG es capaz de soportar la proliferación celular durante siete días. Conclusión. Podemos mencionar que la radioesterilización no modificó las  características de la membrana electrohilada, manteniendo viables  y proliferando a los fibroblastos dermales.