Preservación del Fenotipo Nativo de Fibrocondrocitos del Menisco Humano mediante un Órgano en un Chip

Resumen

Introducción: El menisco es una estructura fibrocartilaginosa crítica para la biomecánica de la articulación de la rodilla. Las lesiones meniscales son altamente prevalentes y su reparación se ve limitada por la pérdida del fenotipo nativo de los fibrocondrocitos (FCs) durante el cultivo in vitro convencional, fenómeno conocido como desdiferenciación. Los sistemas de Órgano en un Chip (OoC) representan una plataforma microfluidica de vanguardia que permite replicar el microambiente fisiológico celular con mayor fidelidad que los modelos bidimensionales tradicionales.

Objetivo: Desarrollar un modelo de Órgano en un Chip capaz de preservar el fenotipo nativo de fibrocondrocitos humanos aislados del menisco, evaluando la expresión de marcadores fenotípicos clave (COL2A1, COL1A1, SOX9) mediante inmunofluorescencia indirecta.

Metodología: Se aislaron fibrocondrocitos de tejido meniscal humano obtenido del INR y se cultivaron en chips de PDMS fabricados mediante litografía blanda. El diseño microfluidico fue validado computacionalmente mediante simulación CFD (ANSYS Fluent), garantizando condiciones de esfuerzo cortante fisiológico (0.01–0.1 dyn/cm²). Las superficies de cultivo fueron funcionalizadas con Sulfo-SANPAH y recubiertas con proteínas de matriz extracelular. La caracterización fenotípica se realizó por inmunofluorescencia indirecta para COL2A1, COL1A1 y SOX9, con análisis cuantitativo de imágenes en ImageJ/Fiji mediante el índice CTCF.

Resultados esperados: Se espera que el modelo OoC genere condiciones de flujo que favorezcan la retención del fenotipo fibrocondrocítico, evidenciada por una mayor expresión de COL2A1 y SOX9 respecto al cultivo estático 2D. La plataforma busca establecer una metodología reproducible para la investigación de terapias regenerativas del menisco