EFECTO DE PTEROPODINA Y BETA-SITOSTEROL SOBRE LA RESPUESTA INMUNE EN RATÓN BALB/c Y CITOTOXICIDAD EN CÉLULAS TUMORALES HepG2.

Resumen

INTRODUCCIÓN: El beta-sitosterol (BS) y la pteropodina (PT) son fitofármacos derivados de vegetales con actividades farmacológicas de alto interés biomédico, tales como propiedades inmunoestimulantes, antimutagénicas, antioxidantes y antiinflamatorias. Debido a esto, es probable que posean actividad inmunomoduladora y citotoxicidad selectiva, fundamentando el interés de evaluar su acción en un modelo murino y su efecto citotóxico en líneas celulares tumorales.

OBJETIVO: Evaluar el efecto de citotoxicidad en células tumorales ejercido por PT y BS, así como su actividad sobre la respuesta inmune contra antígenos timodependientes en ratones BALB/c.

METODOLOGÍA: Se utilizaron ratones BALB/c (10-12 semanas de edad, 30-35 g). Se administraron por vía oral dosis de BS (100, 200 y 300 mg/kg) y PT. Como control positivo de inmunización se utilizaron glóbulos rojos de carnero (GRC) al 10% y como control negativo aceite mineral. Para la respuesta inmune, se empleó la técnica de Jerne modificada por Cunningham en células de bazo para medir la producción de células formadoras de placas hemolíticas (CFP-IgM; n=5-10 por grupo). Para el estudio de citotoxicidad, se evaluaron las líneas celulares 3T3 (fibroblastos normales) y HepG2 (hepatoma), determinando el porcentaje de citotoxicidad a diferentes tiempos de incubación (12 a 72 horas) mediante análisis microscópico y el ensayo de reducción de MTT (n=3). El análisis estadístico se realizó con la prueba t de Student.

RESULTADOS: La administración basal de BS presentó un efecto dual significativo dependiente del sexo: provocó un aumento dosis-dependiente de hasta el 98% (568 ± 11.0 CFP/millón; p < 0.05) en ratones hembras, mientras que en machos generó una inhibición de la respuesta basal frente al control (p < 0.05). Por otra parte, la evaluación del esquema temporal de inmunización con BS (combinando sexos) demostró que la administración conjunta ("Durante") con el antígeno potencia significativamente la respuesta inmune celular, alcanzando un incremento del 133% (257 ± 11.0 CFP/millón; p < 0.05) con la dosis de 300 mg/kg en comparación con el control positivo de GRC. El grupo control negativo no mostró formación de CFP-IgM. En los ensayos in vitro, ambos compuestos demostraron un perfil seguro y baja citotoxicidad en la línea celular normal 3T3 (mortalidad < 22%). En la línea tumoral HepG2, el BS mostró una respuesta moderada dependiente del tiempo (hasta 69% a las 48 h), confirmando su viabilidad para activar vías indirectas del hospedero.

CONCLUSIONES: El estudio demostró actividades biológicas relevantes para ambos compuestos. Se confirmó el potencial inmunomodulador del beta-sitosterol, caracterizado por una respuesta diferencial por sexo y una optimización de la producción de anticuerpos IgM cuando se administra conjuntamente con el antígeno. Asimismo, ambos fitofármacos evidenciaron ausencia de citotoxicidad severa en células normales, validando su seguridad biológica y abriendo la pauta para futuros esquemas antitumorales.